香焦伊人-香港三级日本三级三级人妇99-香港黄页亚洲一级-香港国产特级一级毛片-闲人吧综合免费888精品-先锋资源亚洲

技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 自動誘導超級肉湯培養基 Super Broth

自動誘導超級肉湯培養基 Super Broth

更新時間:2023-02-28   點擊次數:1938次

自動誘導超級肉湯培養基Super Broth產品描述:

自動誘導超級肉湯培養基(Autoinductive Super Broth)也稱自動誘導SB,用于大腸桿菌Lac啟動子驅動的的重組蛋白表達,無需添加IPTG。自誘導培養基能夠獲得高細胞密度,蛋白表達率高出IPTG誘導過程好幾倍。

SB自動誘導培養基工作原理

SB培養基由于其高密度的營養成分,非常適合重組大腸桿菌的快速生長。超級肉湯培養基是一種加富培養基,配方基于TB培養基(Terrific Broth),后者由LB培養基改進而來,目的是達到高細胞密度。E. coli在該培養基中生長速度快于其在LB培養基或 2x YT肉湯中的生長速度。SB培養基被認為是很佳的質粒擴增培養基。一般來說,在液體培養基中大腸桿菌細胞生長的質量如下:LB Broth < 2x YT Broth < Terrific Broth < Super Broth。

該培養基中含有理想比例的葡萄糖和α-乳糖作為碳源和能量來源。胰蛋白胨提供氮源、維生素、礦物質和氨基酸,這些營養成分是細胞生長所必需的。酵母提取物是豐富的B族維生素來源。Studier salts為細菌細胞的生長提供很佳的生理環境。

通常,外源蛋白在細菌中表達時常使用IPTG誘導的啟動子,如Lac啟動子。當細胞密度達到理想值時,通過向培養基中加入IPTG的方法誘導蛋白表達。使用這個自動誘導培養基,不再需要監測細胞密度和添加IPTG。葡萄糖作為半乳糖操縱子的阻遏因子阻止細菌利用α-乳糖,而被優先代謝,促進高密度生長。一旦培養基中的葡萄糖被耗盡(通常發生在對數期的后期),乳糖被?-半乳糖苷酶轉換成異乳糖(葡萄糖-1,6-半乳糖),而后者作為IPTG誘導型啟動子的誘導劑,引起乳糖阻遏子從與DNA結合的位點上釋放,啟動重組蛋白的表達。對于DE3基因型的E.coli中,異乳糖使T7lac啟動子去阻遏,并誘導lacUV5啟動子表達T7 RNA聚合酶。通過這種方式,在細菌培養物生長到某一特定點時蛋白表達自發開始,去掉了監測細胞密度(OD600)和添加IPTG這兩個步驟。與傳統IPTG誘導的蛋白表達過程相比,使用自動誘導培養基極大地方便和簡化了試驗流程。


使用步驟:

1. 稱取74.85 脫水培養基粉末,用1L去離子水加熱溶解。

2. 煮沸1min。

3. 115°C 滅菌20min。

不要過度加熱,避免乳糖分解和培養基顏色加深。冷卻后保存在2-8oC,如果不染菌,可以保存2個月左右。


Quantity: 500g

Appearance: Beige powder. Autoclaved medium should be amber.

Storage: 2oC – 25oC. When not in use, keep container closed to avoid hydration.


配方Formulation (g/L)

Tryptone: 35.00

Yeast Extract: 20.00

MgSO4: 0,15

(NH4) 2SO4: 3,30

KH2PO4: 6,80

Na2HPO4: 7,10

Glucose 0,50

Alpha Lactose 2,00

Final pH (25oC): 7,0 ± 0,2


配置Preparation:

Add 45,85g of the dehydrated medium to one liter of distilled water. Mix well and dissolve by heating with regular agitation. Boil for 1 minute in order to dissolve completely. Dispense in appropriate containers and sterilize by autoclaving at 121oC for 15 to 20 minutes. Store at 2oC to 8oC.


使用Usage

Commonly, heterologous protein expression is carried out in bacterial systems where the expression is under the control of an IPTG-inducible promoter, such as the Lac promoter. Cells are grown until a desired density and protein expression is subsequently induced by adding IPTG to the medium. With this Auto Induction Medium (AIM), it is no longer required to monitor cell density and to add IPTG at the proper stage, as the medium contains an optimized ratio of glucose and alpha lactose as carbon sources. Glucose, who serves as a repressor of the Lac operon, by preventing uptake of alpha lactose (hence and IPTG) is metabolized preferentially during growth, promoting high cell density. Once glucose is depleted, usually in mid to late log phase, lactose enters the cell where it is converted by ?galactosidase into allolactose, which in turn serves as the inducer of the IPTG-inducible promoter, resulting in protein expression. This is a great convenience and simplifies manual or automatic induction and analysis of multiple clones compared to conventional IPTG  induction.


靶點科技(北京)有限公司

靶點科技(北京)有限公司

地址:中關村生命科學園北清創意園2-4樓2層

© 2025 版權所有:靶點科技(北京)有限公司  備案號:京ICP備18027329號-2  總訪問量:273514  站點地圖  技術支持:化工儀器網  管理登陸

主站蜘蛛池模板: 亚洲国产欧美在线人成 | 免费看伦理片 | 日本大尺度动漫在线观看缘之空 | 啊啊啊好大视频 | 韩国三级年轻的小婊孑 | 亚洲精品卡一卡2卡3卡4卡 | 我年轻漂亮的继坶2中字在线播放 | 成人高清网站 | 四虎精品视频在线永久免费观看 | 精品国产在天天线在线麻豆 | 国产果冻传媒 | 2022国产麻豆剧传媒古装 | chinese圣水黄金调教 | 97色轮| 欧美日韩精品乱国产 | 国产亚洲一欧美一区二区三区 | 精品国产日韩一区三区 | 男女姓交大视频免费观看 | 日本九九热 | 日本高清不卡一区久久精品 | aaaa大片| 久久不射视频 | avtt在线观看| 暖暖 免费 高清 日本 在线1 | 5x社区发源地最新地址 | 无码人妻视频又大又粗欧美 | 亚洲精品色婷婷在线影院麻豆 | cosplay 极品videos| 免费人成网址在线观看国内 | 四虎现在的网址入口2022 | 欧式午夜理伦三级在线观看 | 美女沟厕撒尿全过程高清图片 | 香蕉在线播放 | 欧美兽皇video | 日韩一级欧美一级一级国产 | 99精品国产成人a∨免费看 | www.四虎在线 | 国产yw193.㎝m在线观看 | 女教师系列三上悠亚在线观看 | 久久高清一级毛片 | 欧美一级专区免费大片俄罗斯 |