我們在使用荷蘭Liposoma巨噬細胞清除劑Clodronate Liposomes(CP-005-005)氯膦酸鹽脂質體清除小鼠巨噬細胞時,需要評估清除效果和體系。這時,我們可以同時取樣腹腔,脾臟和骨髓巨噬細胞。作為參考,我們需要知道不同部位巨噬細胞-脾臟、腹腔和骨髓流式特征。
小鼠骨髓BMs、脾臟 SPMs 和腹膜腔PCMs的巨噬細胞的活化狀態,包括靜息 (M0) 和極化 (M1 和 M2) 。并且每只小鼠的巨噬細胞產量也不同。對于WT小鼠,我們可以參考別人的文獻,一來質控自己的數據,二來評價自己的體系和動手能力。具體我們可以參考這篇文獻。Yan-long Zhao, Pu-xun Tian, Feng Han, et al. Comparison of the characteristics of macrophages derived from murine spleen, peritoneal cavity, and bone marrow[J]. Journal of Zhejiang University-SCIENCE B (Biomedicine & Biotechnology), 2017, 18(12):1055-1063. DOI: 10.1631/jzus.B1700003.
對于巨噬細胞,高度異質性。我們是通過一些Marker,利用流式方法學界定的。 因此,比如圖C,這個數據,純屬參考,單純一看而已。骨髓與脾臟,腹腔,明顯巨噬細胞細胞Marker差的很遠。骨髓是那個部位的骨髓?骨髓相比較脾臟和腹腔,明顯多個部位。這些細節,都是我們需要注意的,否則單純看圖,知其然不知道其所以然。他說的骨髓和我們以為的骨髓不是一個骨髓。
在流式細胞術中,FSC(Forward Scatter)和SSC(Side Scatter)是兩種重要的信號。通過這兩種信號,我們可以更深入地了解細胞的結構和特性。
FSC,即前向散射,是當細胞通過激光束時,由于細胞形狀和大小的不同,激光會以不同的角度折射,這些折射光被接收器捕捉并轉化為電信號。細胞越大,折射角度越大,FSC信號就越強。
SSC,即側向散射,是激光照射到細胞上后,被大角度反射并被側向檢測器接收。SSC主要探測細胞的顆粒度,例如在neutrophils分化過程中,細胞核的形態變化可以通過SSC信號來反映。
參考文獻,僅僅就是參考,參考,參考。
小馬過河,是我們小時候學過的課文。各種動物,說的都沒有錯。但是,但是,對嗎?我們可以參考他們的說法,對不對要自己判斷。
盲人摸象,也是我們小時候學過的課文。各個盲人,說的都沒錯。但是,對嗎?對嗎?我們可以參考他們的說法,對不對要自己判斷。
科研的過程,何嘗不是小馬過河,何嘗不是盲人摸象?
參考文獻:
Yan-long Zhao, Pu-xun Tian, Feng Han, et al. Comparison of the characteristics of macrophages derived from murine spleen, peritoneal cavity, and bone marrow[J]. Journal of Zhejiang University-SCIENCE B (Biomedicine & Biotechnology), 2017, 18(12):1055-1063. DOI: 10.1631/jzus.B1700003.